這篇的重點：
。我們成功證明了Easy clone multi酵母質體更適合作為益生酵母S. boulardii (布拉酵母)基因改造的載體，並且使其分泌ANP以緩減腸道發炎的症狀

這篇的背景：
。作為益生菌，布拉酵母已知可以改善腸道菌相以及減緩腸道發炎反應，這使得布拉酵母菌具有作為釋放藥物平台的潛力
。Easy clone multi跟Easy clone2.0都是作為釀酒酵母（S. cerevisiae）基改的平台，但是對於布拉酵母的基改研究相對較少
。心鈉肽(Atrial natriuretic peptide, ANP)主要已知跟心臟調節血壓相關，最近的文獻也報導了其免疫調節的功能

這篇的發現：
。我們成功建立了提高布拉酵母基改效率的方法，這將有利於布拉酵母在學術以及工業化的發展
。作為其中一個應用，我們證明分泌ANP的布拉酵母有益於改善由DSS造成的腸道潰瘍

雜談：

在做這篇研究前，對於酵母只有模糊的印象
大概最多就是yeast two hybrid🤣
某天，我的指導老師跑來問我：你有做過酵母的經驗嗎？
我一方面跟老師說沒有
另一面心頭一驚，我內心立馬想到該不會要做yeast two hybrid吧🤣
是不是開始要研究這個技術了wwww
不過老師聽到我的回答，很開心的說
我也沒有做過🤣我們就一起來研究吧～

跟養菌不大一樣，酵母在培養基上長的比較慢
通常要等個兩三天才會形成菌落，不過眼睛夠給力的話
是可以在隔天看到一些迷你菌落，然後就可以提前規劃策略😆
酵母養出來也有一種香味，跟養菌不同
也因為養出來的味道不一樣，如果有污染，其實是可以用鼻子聞出來的w
一個小題外話，除了我以外，其他人做的都是釀酒酵母的研究
這大概也是一種分散風險吧😆

當初其實有找布拉酵母基改的文獻，不過那時候找到的文獻不大多
嘗試了他們的做法後，發現在我的實驗裡
雖然可以得到一些菌落，但是基改的效率並不是很好
在做了很多次嘗試後，我觀察自己的實驗數據
發現到一些關聯性，做了一些條件的嘗試後
終於可以大幅增加布拉酵母的轉殖效率

順帶一提，這些基改的方法，在使用釀酒酵母當作載體時
基改的效率非常好👍果然雖然都是酵母，轉出來的效率還是天差地別呀

一開始這篇研究的賣點
其實不是想要做提升基改效率的題目😆

我們原本打算做出可以當作保健食品賣專利的基改酵母
不過大概是我的know how還不足吧
即便我們做了相當多嘗試，但仍舊無法讓腸道潰瘍的小鼠
經由我們的酵母治療後，達到完全痊癒的效果
我跟老師討論，甚至還在想是不是因為胃酸的關係
導致基改酵母的效力降低
於是我還跑去做了酵母果凍然後喂給腸道潰瘍的小鼠🤣
那些果凍還是顆粒狀，可以讓小鼠喝下去程度大小的果凍

不過最後還是沒有達到我們最終希望的效果🫠 只有減緩潰瘍的成效而已

當初我跟老師討論投稿的時候，也蠻有趣的
老師那時候跟我說，他覺得可以把這個研究停住發表了
不過那時候其實我也蠻苦惱的，因為動物實驗的結果
對於我跟老師來說都不算漂亮（雖然有拿到顯著差異的結果）
我把我的擔憂跟老師說之後，他也沒有說什麼就回去想想了

後來我自己在想，如果真的要發
可以從哪個角度出發？想著想著，我就想到了我們先前發表的第一篇著作
從技術面上來看，我覺得我們還是可以寫出些什麼
後來老師跑來跟我說，他想不到有什麼發表的理由時
我就把我的想法說給他聽，他想了一想
只說了句：噢，那我們的故事要全部重新改寫排版一輪 於是就投出了這一篇論文

其實因為第一篇投稿的陰影，我其實後來都覺得
有拿到revise都不應該要開心，只有拿到accepted才算是真的開心
不過還好這篇很順利的一次就接到revise然後順利的accepted
老師後來有點打趣的說，這篇有點撿到😆
（這樣說算是好的嗎……🤔）
不過就結果來說，我可能在這裡就拿到了兩張畢業門票
雖然老師那時候說，這兩篇不會是我的畢業論文
那時候我自己想想也覺得還合理吧，雖說IF並不是那麼重要
但是在追求IF的台灣，應該還是要發一篇high IF當作我的畢業代表作才行
於是之後就要講第三篇，也就是最後一篇我的畢業論文了😆希望不會拖得太久🤪

小小的題外話，有點在猶豫在寫最後一篇代表作之前
要不要寫個我自己身為第三作者的論文雜談🤔
雖然篇幅或許不會太多就是了